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液相色谱仪

乳制品三聚氰胺检测液相色谱仪

日期:2016年05月29日  来源:未知  浏览:78

三聚氰胺:英文名“melamine”,简称三胺,学名三氨三嗪,别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。分子式:C3N6H6、C3N3(NH2)3;分子量:126.12;物理性能:白色结晶粉末,无毒,无味;相对密度:1570kg/m³;熔点:在常压下,354℃分解;升华温度:300℃;溶解性:能溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶;微溶于水、乙醇;不溶于乙醚、苯和四氯化碳,水溶液呈弱碱性。

化学性能:三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料,显弱碱性,能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐;在强酸或强碱液中,三聚氰胺发生水解,胺基逐步被羟基取代,生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸;三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物;三聚氰胺与甲醛反应制成树脂,三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料,防火耐热且有很高的稳定性,用于生产塑料、地板砖,厨房用具,防火纤维,商业滤膜,胶水和阻燃剂。

乳制品三聚氰胺检测液相色谱仪
乳制品是指以生鲜牛(羊)乳及其制品为主要原料,经加工而制成的各种食品。本标准所指的乳制品包括液体乳类(杀菌乳、灭菌乳、酸牛乳、配方乳)、乳粉类(全脂乳粉、脱脂乳粉、全脂加糖乳粉和调味乳粉、婴幼儿乳粉、其他配方乳粉)、含乳饮料类、炼乳类(全脂无糖炼乳、全脂加糖炼乳、调味炼乳;配方炼乳)、乳脂肪类(稀奶油、奶油、无水奶油)、干酪类(原干酪;再制干酪)、乳冰淇淋类(乳冰淇淋、乳冰)和其他乳制品类(干酪素、乳糖、乳清粉、浓缩乳清蛋白)等。
 
高效液相色谱法测定

1.  原理
    试样经溶解、超声提取、沉淀蛋白、过滤得到测试液,经高效液相色谱测定,根据保留时间和紫外吸收光谱定性,根据峰面积进行定量。
2  试剂
方法中所用试剂,除另有规定外,均为分析纯试剂,水为GB/T 6682-2008中一级用水,溶液为水溶液。
2.1  磺基水杨酸。
2.2  柠檬酸。
2.3  辛烷磺酸钠:高效液相色谱离子对试剂。
2.4  乙腈:色谱纯。
2.5  盐酸。
2.6  60 g/L磺基水杨酸:称取60 g磺基水杨酸用水定容至1 L。
2.7  0.1 mol/L盐酸:量取8.3 mL盐酸用水稀释至1 L。
2.8  缓冲液:柠檬酸和辛烷磺酸钠浓度均为10 mmol/L。
2.9  三聚氰胺标准品:已知含量大于99%。
2.10 标准储备液:称取三聚氰胺标准品0.01g(准确至0.0 001g),用甲醇配制成浓度为1mg/mL标准储备液。
2.11 标准系列:将标准储备液用0.1 mol/L盐酸逐级稀释至0.25µg/mL,0.50µg/mL,1.00 µg/mL,2.00 µg/mL,4.00 µg/mL,5.00 µg/mL,10.0 µg/mL的系列标准溶液。
3  仪器
3.1  高效液相色谱,附二极管阵列检测器或紫外检测器。
3.2  天平:感量0.01 g。
3.3  分析天平:感量0.0 001 g。
3.4  高速离心机:转速>4 000 r/min。
3.5  超声波清洗器。
3.6  旋涡混匀器。
4  样品处理
4.1  固态乳制品
称取1.0 g左右试样(准确至0.0 001 g),加入0.1 mol/L 盐酸约15 mL,涡旋混匀,超声提取30 min后加入60 g/L磺基水杨酸6 mL ~8 mL,用0.1 mol/L 盐酸定容至25 mL,混匀后离心,上清液经0.45 µm的微孔滤膜过滤后进样。
4.2  液态乳制品(包含酸奶)
称取15 g左右试样(准确至0.0 001 g),加入60 g/L磺基水杨酸3 mL~4 mL,用0.1 mol/L 盐酸定容至25 mL,混匀后离心,上清液经0.45 µm的微孔滤膜过滤后进样。
4.3  饲料
称取1.0g左右试样(准确至0.0 001 g),将样品用研钵充分碾碎混匀,加入0.1 mol/L 盐酸约15 mL,涡旋混匀,超声提取30 min后加入60 g/L磺基水杨酸6 mL ~8 mL,用0.1 mol/L 盐酸定容至25 mL,混匀后离心,上清液经0.45 µm的微孔滤膜过滤后进样。
5  测定步骤
5.1  色谱条件
5.1.1  色谱柱:ODS或C8,250 mm×4.6 mm,5 µm。
5.1.2  流动相:缓冲液︰乙腈=85︰15。
5.1.3  流速:1.0 mL/min。
5.1.4  柱温:40 ℃。
5.1.5  波长:240 nm。
上述色谱条件是典型的,可根据实际情况做具体调整。如果分离效果不理想,将水相改为:柠檬酸和辛烷磺酸钠浓度均为10 mmol/L,加3mL三氯乙酸,配制成1000mL溶液,流动相用氨水调PH值3.9到3.95。
5.2   测定
5.2.1  标准曲线制备
 
将标准系列0.25µg/mL,0.50µg/mL,1.00 µg/mL,2.00 µg/mL,4.00 µg/mL,5.00 µg/mL,10.0 µg/mL分别进样20 µL,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标作图,制作标准曲线。

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